Relationship between endostatin expression and the invasion of rectal cancer
ABSTRACT: Objective To investigate the relation of endostatin (ES) and the vascular formation in rectal cancer, and the effect of ES on the invasion of rectal cancer. Methods The expression level of ES and microvessel density (MVD) in 10 cases of normal rectal tissues and 40 cases of rectal cancer were detected by immunohistochemistry staining. Results The expression level of ES in normal rectal tissues was obviously stronger than that in rectal cancer (P<0.05). There was a negative relation between the expression level of ES and MVD in rectal cancer with the changes of the depth of infiltration and lymph node metastasis (P<0.05). Conclusion With the decrease of ES, the number of knubbly vessels increases. The decrease of ES can promote infiltration of rectal cancer and metastasis of lymph node.
KEY WORDS: endostatin; microvessel density; rectal cancer
新近研究表明，血管生成在惡性腫瘤的生長、侵襲及轉移中具有重要作用，血管生成的啟動是腫瘤微環境中血管生成刺激因子和抑制因子平衡改變的結果。內皮抑素(endostatin, ES)是近年來發現的抑制腫瘤血管生成的一種細胞因子，為ⅩⅧ型膠原C?末端的184個氨基酸片段，能通過誘導內皮細胞的凋亡、阻斷血管內皮生長因子的作用、抑制基質金屬蛋白酶活性等多種途徑抑制新生血管生長，進而抑制腫瘤生長和轉移[1]。腫瘤微血管密度(microvessel density, MVD)是判斷腫瘤血管生成的定量指標[2]。本研究通過檢測直腸癌組織中ES蛋白的表達與MVD，探討 ES與直腸癌血管形成的關係以及在直腸癌侵襲行為中的作用。
1 材料與方法
1.1 臨床資料 選取我院1999-2002年間直腸癌切除術後的石蠟包埋組織40例，其中男性16例、女性24例，年齡20-75歲，平均年齡55歲。正常直腸組織10例為對照。按Dukes分期A期7例，B期15例，C期18例。
1.2 檢測方法 採用免疫組織化學SP法。鼠抗人ES單株抗體、鼠抗人CD34單株抗體和免疫組織化學染色試劑盒(SP kit) 均購自福州邁新公司。按試劑盒說明書所示步驟進行操作。
1.3 結果判定 ES陽性表達主要定位於細胞核或細胞漿，呈棕黃色。依據高倍鏡視野下(×400)陽性細胞數所佔比例進行評分。1分：陽性細胞≤5%；2分：陽性細胞為5%-20%；3分：陽性細胞為21%-50%；4分：陽性細胞>50%。MVD的測量方法：在高倍鏡視野下(×400)隨機計數5個視野的被CD34染成棕黃色的血管數目，取其平均值作為MVD，每一個與鄰近的微血管明顯分離的陽性染色的血管內皮細胞或內皮細胞簇均視為獨立的`微血管。
1.4 統計學方法 採用SPSS10.0統計軟體進行統計學處理，實驗資料用均數±標準差(±s)表示，組間比較採用單因素方差 分析 ，相關分析採用秩和檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。
2 結果
2.1 正常直腸組織與直腸癌組織中ES的表達及MVD ES陽性表達主要在正常直腸黏膜組織。直腸癌組織中邊緣區細胞ES染色要強於中心區，一些壞死組織周邊區也可見到強陽性染色出現。直腸癌組織的MVD明顯高於正常黏膜組織(P<0.05，表1)。
表1 正常直腸組織與直腸癌組織中ES 的表達及MVD（略）
Table 1 The expression level of ES and MVD in normal rectal tissues and rectal cancer
*P<0.05 vs. normal rectal tissue