草魚是當前我國養殖量最大的淡水養殖品種之一，年產量超過400萬t，在草魚的飼養過程中，苗種階段的飼養至關重要，該階段幼魚處在生長髮育的關鍵時期，且這時期水溫逐漸升高，水體中病原微生物複雜多變，幼魚病害較多（腸炎、出血、爛鰓和白頭白嘴病等），病死率高。為了提高該時期苗種的成活率，養殖戶通常會採取一些預防性措施，比較常規的措施就是在該時期的幼魚餌料中適量加入一些抗生素藥物來降低病害的發生率，然而隨著當前抗生素藥物的使用逐漸受到限制，一些免疫增強劑逐漸被人們關注。免疫增強劑是一個有著廣闊應用前景的新興領域，水產中較常用的免疫增強劑主要有合成化學劑類、微生物類衍生物、動植物提取物、維生素和乳鐵蛋白等，它們的生物相容性好、可降解、不會造成環境汙染且對人類安全，並且能顯著提高細胞吞噬活性和溶菌酶活性，增強機體清除超氧化陰離子的能力。免疫增強劑主要通過非特異性免疫因子來達到防病和抗病目的，雖然不產生免疫記憶，但卻能夠在短期內顯著提高機體的抗病能力。酵母免疫多糖就是一種富含β-葡聚糖和1,3-甘露寡糖的天然免疫增強劑，由於其使用方便而日漸受到人們的青睞。文章就酵母免疫多糖在草魚苗種中的應用試驗來探討酵母免疫多糖對草魚生長效能及免疫功能的改善，從而為提高苗種階段草魚的成活率提供一種新的思路和理論依據。
1材料與方法
1.1試驗飼料配方及試驗設計
基礎飼料1為含4%魚粉的實用飼料，基礎飼料2不含魚粉，其組成及營養成分含量見表1。飼料原料全部經粉碎，過60目篩，微量成分採取逐級擴大法新增，與大宗原料混合均勻後，加工成直徑為1.5mm的顆粒，經600℃烘乾、破碎和過篩，最終篩選出直徑在0.3~0.45mm的顆粒置於-20℃冰箱備用。根據不同的酵母免疫多糖新增量，分組進行試驗，其中2個對照組，7個試驗組，共9個處理，分別為含有4%魚粉試驗組的4個處理（0、0.5、1和2g/kg酵母免疫多糖）和不含4%魚粉的試驗組的5個處理（0、0.5、1、2和5g/kg酵母免疫多糖）。
1.2試驗魚的飼養管理
試驗共設9個處理，每處理組設4個平行，相應安排36個水族箱（70cm×35cm×95cm），每個水族箱容水量為200L，靜水，氧氣頭不間斷增氧，每天換掉1/3的水並及時加註新水。飼養試驗在安琪酵母公司當陽試驗場進行，試驗用魚為草魚幼魚，試驗魚從魚塘取出時先經藥液浸浴消毒後，暫養在水族箱中，用基礎飼料馴化2周，待魚安定並習慣後開始試驗。每箱放養30尾，試驗開始時幼魚平均體質量（4.10±0.10）g，試驗魚規格整齊且健康活潑，隨機分配到各水族箱中，每天投飼量約佔體質量的2%，日投喂4次（早上07：00、中午11：00、下午15：00和晚上19：00），每次投餌時做到少量多次，讓幼魚儘量飽食，幼魚不搶食時停止投食。每週定期消毒2次，養殖試驗期間水溫（27±2）℃，溶解氧>5.0mg/L、NH3-N<0.3mg/L，晝夜持續供氣，飼養時間2010年8月20日至10月1日，共40d。
1.3樣品收集和分析
在養殖試驗開始前及結束後，將各處理組的幼魚稱質量，統計各處理組的增質量情況，試驗期間每天統計各組魚的採食量。試驗結束後，魚禁食1d後稱質量，每個試驗水箱隨機取出3尾魚用MS-222麻醉後從尾鰭靜脈取血，血樣放置在4℃冰箱中儲存約3h，待血清充分析出後，在3000r/min下離心15min，分離出上層血清轉入1.5mL離心管中，用日立HITACHI7600-120全自動生化分析儀進行血液生化指標測定。
1.4測定指標與方法
試驗開始後，每天統計各試驗組幼魚的死亡情況，死魚及時撈出並測定其體質量，並以此來矯正試驗結束時該試驗組的總增質量。餌料係數=總投飼量（g）／（末質量-初質量）（g）；病死率=試驗幼魚死亡數／試驗初魚尾數×100%
1.5資料處理和統計方法
試驗結果用平均數±標準差表示，試驗資料通過SPSS16.0統計軟體進行處理分析，資料先用單因素方差分析進行處理，百分數需經過平方根反正弦轉換，若組間有差異，再用Duncan氏多重比較法檢驗不同酵母免疫多糖新增量下草魚幼魚的生長效能、病死率及血液各項指標間的差異顯著性，P<0.05為顯著性水平。
2試驗結果分析
2.1草魚幼魚存活率
從表2和表3可見：經過40d飼養，在含有魚粉的飼料中新增酵母免疫多糖能減低幼魚的病死率，0.5‰~2‰不同梯度多糖新增對幼魚的存活率影響不大，且隨著新增量的增加，累計病死率逐漸降低。而在不含有魚粉的草魚幼魚飼料中新增酵母免疫多糖對病死率影響較大，對照組40d試驗期間累計病死率達到20.83%，是所有處理組中病死率最高的，在不含魚粉的飼料中新增酵母免疫多糖後，與該對照組相比草魚幼魚的成活率有較大幅度的提升，並隨著新增量的增加各組幼魚病死率有逐漸降低的趨勢，5‰新增組在整個試驗週期未見幼魚死亡。
2.2草魚幼魚生長效能的變化
從表2和表3可見：在含有魚粉或不含魚粉的草魚飼料中不同比例新增酵母免疫多糖能有效降低餌料係數，其中在含有魚粉的飼料中新增0.5‰酵母免疫多糖降低餌料係數的比例最大，與魚粉對照組相比降幅達12.4%，不同酵母免疫多糖新增量間的餌料係數沒有表現出顯著差異，0.5‰多糖組表現出最佳的生長效能，幼魚病死率低，增質量最明顯。在不含魚粉的飼料中使用酵母免疫多糖也能顯著降低餌料係數，其中5‰多糖組的生長狀況最佳，整個試驗結束時未出現死亡情況且增質量最明顯。魚粉新增組幼魚的生長效能普遍好於未新增魚粉組，從表3可見：酵母免疫多糖的新增極大地改善了無新增魚粉組幼魚的生長效能。
2.3草魚血液生化指標的變化
從表4可見：血清中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶的活性及免疫球蛋白含量，隨著酵母免疫多糖新增量的增加有降低的趨勢，其中2‰多糖組的以上2指標顯著低於其他低劑量組（0.5‰多糖組和1‰多糖組）和對照組1，而0.5‰多糖組、1‰多糖組和對照組1三者間在這2項指標上不存在顯著性差異；血清中免疫球蛋白含量和鹼性磷酸酶活性隨著酵母多糖新增量的.增加有逐漸增加的趨勢，其中1‰多糖組及2‰多糖組血清中鹼性磷酸酶活性顯著高於對照組1及0.5‰多糖組。從表5可見，2‰多糖組及5‰多糖組血清中谷丙轉氨酶和穀草轉氨酶活性顯著低於對照組2和酵母免疫多糖低劑量新增組，血清中免疫球蛋白含量及鹼性磷酸酶活性有隨酵母免疫多糖新增量的提高而增加的趨勢，特別是多糖新增組血清中鹼性磷酸酶活性均顯著高於對照組2。
3討論
酵母免疫多糖是酵母細胞壁的重要組成部分，佔酵母細胞壁幹質量的40%，因提取方式的不同，其組成也有所變化，其主要成分為β-葡聚糖和甘露寡糖。酵母細胞壁多糖能激發和增加機體的免疫力和抗病力，對細菌、真菌和病毒引起的水產動物疾病及運輸、分塘、氣候變化和養殖水環境變化等引起的應激反應產生非特異性免疫力，從而降低由應激導致的疾病發生率。
3.1酵母免疫多糖對草魚幼魚病死率及生長效能的影響
通過試驗可見，在草魚飼料當中適當新增酵母細胞壁多糖確實能提高草魚幼魚的生長效能，降低幼苗階段的病死率。尤其是對於沒有新增魚粉的飼料組來說，酵母免疫多糖的新增不僅有效降低成本，而且顯著降低了餌料係數，促進了幼魚的快速生長。酵母免疫多糖能提高草魚苗種的成活率和生產效能，可能主要由於酵母免疫多糖的新增激活了幼魚自身免疫系統，從而提高了幼魚對周圍應激及養殖病害的抵抗能力，一方面減少養殖病害的發生，另一方面減少了機體在應對病原菌方面的能量消耗進而間接促進了生長效能的提高，與李海燕對豐產鯽的研究結果相一致。酵母免疫多糖的新增增加了飼料的適口性，進而增強了幼魚採食餌料的主動性並提高採食量。在日常投飼過程中我們也發現添加了酵母免疫多糖的餌料明顯具有誘食作用，草魚幼魚表現出叢集和搶食等現象，而沒有新增酵母免疫多糖的對照組幼魚採食不積極。推測主要是因為該酵母免疫多糖中還含有未被完全分離的酵母抽提物，而酵母抽提物中含有豐富的氨基酸和核苷酸能顯著改善飼料原料的適口性，促進動物採食。Brunt等2005年也報道了用含酵母免疫多糖（2.5‰的新增量）的飼料作為虹鱒幼苗的開口餌料能顯著提高幼苗的攝食量，最終提高幼魚的成活率及體長和體質量。
3.2酵母免疫多糖對草魚幼魚血液生化指標的影響
關於酵母免疫多糖對水產動物的免疫效果的影響，以前已經做過一些試驗，試驗表明：酵母免疫多糖對提高水產動物的免疫能力效果明顯。試驗也再次驗證了這一結論，表明在草魚幼魚飼料中新增酵母免疫多糖，對提高攝食量和增質量及降低病死率和料重比有明顯的效果。試驗結果表明：在飼料中新增一定質量濃度的酵母免疫多糖，能夠顯著降低病死率和料重比，同時增加草魚的攝食量，對草魚的肝功能也有一定改善效果，這與異育銀鯽的研究結果相一致。血清中酶活性主要來源於肝膽系統，試驗顯示，飼料中新增酵母多糖能顯著降低谷丙穀草轉氨酶的活性，預示著具有保護肝組織結構完整性和改善肝功能的作用。鹼性磷酸酶是一種重要的代謝調控酶，與DNA、RNA、蛋白質和脂質等的代謝有關，對水生動物的生長有重要意義，也是溶菌體酶的重要組成部分，在免疫反應中發揮作用，試驗中與對照組相比酵母免疫多糖的新增提高了鹼性磷酸酶活性，使機體處於良好的生理狀態，維持機體旺盛的代謝功能，草魚幼魚從而表現出良好的生長狀態，機體非特異性免疫力也有所提高。
4結論
酵母免疫多糖具有提高存活率和促生長作用，同時能減少抗生素類藥物的用量，是控制水產養殖動物特別是甲殼類動物傳染性病害的有效途徑，有利於水產養殖業的健康發展。是一種安全、可靠且能廣泛應用的免疫增強劑，一般來說在疾病預防期或萌發期使用最為有效，隨著研究的深入和認識的加深，它必將成為控制水產動物疾病的有效工具。