一、必須分清非無菌區、相對無菌區、無菌區。
二、手術間分清無菌間、有菌間。如手術間有限，應先做無菌手術。再做汙染手術。
三、對感染和特異性感染等手術，所用的器械、敷料等用物要有嚴格消毒處理措施。不得與其他敷料混合，並有標記。手術後手術間地面和空氣嚴密消毒。
四、手術室洗手、護士鋪臺、刷手、穿隔離衣、戴手套和手術配合均應符合無菌操作要求。
五、巡迴護士進行各種治療注射、拿放無菌物品。應符合無菌操作要求。
六、各種無菌包及無菌容器中的消毒液，由專人負責定期消毒或更換，儘量減少用浸泡消毒的器械，絲線、刀片、剪等應高壓蒸汽消毒。
七、工作人員熟悉各種消毒液的'濃度及使用方法，可根據其效能定期檢測。
八、經常啟蓋的無菌盒，每週重複消毒滅菌，固定的敷料包、器械包，過期應重新滅菌。
九、每月對各項滅菌專案進行細菌監測，每月對工作人員作細菌培養，並做好記錄。
十、用紫外線殺菌燈消毒時，應有時數登記和紫外線強度監測並登記。
十一、手術室應有定期清潔衛生制度，每日、每週、每月定人、定點、定時，做好清潔、消毒工作。定期做空氣培養，手術室空氣中細菌總數不得超過200個/m3。