2017年檢驗技師考試《免疫檢驗》重要考點彙總

才智咖 人氣:1.24W

免疫檢驗是臨床檢驗技師考試的科目之一。你知道臨床檢驗技師考試免疫學檢驗都考哪些知識嗎?下面是本站小編為大家程式碼的免疫檢驗科目考試重點彙總,歡迎閱讀。

2017年檢驗技師考試《免疫檢驗》重要考點彙總

免疫檢驗科目考試重點彙總

0、免疫學檢測技術的基礎是抗原抗體反應。

1、免疫:是機體識別和排斥抗原性異物的一種生理功能

2、免疫防禦(對外);免疫自穩(防自身免疫病);免疫監視(防腫瘤)。

3、中樞免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴結、脾臟(最大)、黏膜相關淋巴組織

4、B細胞:通過識別膜免疫球蛋白來結合抗原,介導體液免疫;B細胞受體=BCR=mIg

表面標誌:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受體、補體受體、EB病毒受體和小鼠紅血球受體。

成熟B細胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B細胞的mIg主要為mIgM和mIgD)同時檢測CD5分子,可分為B1細胞和B2細胞。

B細胞功能檢測方法:溶血空斑形成試驗(體液免疫功能)。

5、T細胞:介導細胞免疫。共同表面標誌是CD3(多鏈糖蛋白);輔助T細胞的標誌是CD4;殺傷T細胞的標誌是CD8;T細胞受體=TCR。

T細胞和NK細胞的共同表面標誌是CD2(綿羊紅血球受體);

CD3+CD4+CD8- = 輔助性T細胞(Th)

CD3+CD4-CD8+ = 細胞毒性T細胞(Tc或CTL)(T細胞介導的細胞毒試驗)

CD4+CD25+ = 調節性T細胞(Tr或Treg)

T細胞功能檢測:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T細胞增殖。增殖試驗有:形態法、核素法。

T細胞亞群的分離:親和板結合分離法,磁性微球分離法,熒光啟用細胞分離儀分離法

*E花環試驗是通過檢測SRBC受體而對T細胞進行計數的一種試驗;

6、NK細胞:具有細胞介導的細胞毒作用。直接殺傷靶細胞(腫瘤細胞和病毒感染的細胞)

表面標誌:CD16(ADCC)、CD56。

測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株,而測定小鼠NK細胞活性則常採用YAC-1細胞株。

7、吞噬細胞包括:單核-吞噬細胞系統(MPS,表面標誌CD14,包括骨髓內的前單核細胞、外周血中的單核細胞和組織內的巨噬細胞)和中性粒細胞。(表達MHCⅡ類分子)

8、人成熟樹突狀細胞(DC)(專職抗原呈遞功能):表面標誌為CD1a、CD11c和CD83。

9、免疫球蛋白可分為分泌型(sIg,主要存在於體液中,具有抗體功能)及膜型(mIg,作為抗原受體表達於B細胞表面,稱為膜表面免疫球蛋白)

10、免疫球蛋白按含量多少排序:IgG>IgA>IgM>IgD>IgE五類(按重鏈恆定區抗原性(CH)排序)

免疫球蛋白含量測定:單向環狀免疫擴散法、免疫比濁法。

11、免疫球蛋白的同種型抗原決定簇位於恆定區(CH、CL)

12、抗體由漿細胞產生。抗體分子上VH和VL(高變區)是抗原結合部位。

13、IgG:血清中含量最高的免疫球蛋白(IgG1最高),血液和細胞外液中的主要抗體。也是再次免疫應答的主要抗體,是唯一能通過胎盤的抗體,大多數抗菌抗體、抗病毒抗體是IgG,某些自身抗體及超敏Ⅱ型抗體是IgG,免疫學檢測中第二抗體也以IgG為主。

14、IgA:分血清型(單體存在)及分泌型;分泌型IgA(sIgA)為二聚體,效能穩定,主要存在於胃腸道、支氣管分泌液、初乳、唾液、淚液中,區域性濃度高,是參與黏膜區域性免疫的主要抗體。

15、IgM:為五聚體,主要存在於血液中,是Ig中分子量最大的(又稱巨球蛋白)。個體發育最早合成和分泌的抗體。抗原刺激後體液免疫應答中最先產生的抗體,感染過程中血清IgM水平升高,說明近期感染。新生兒臍血中若IgM增高,提示有宮內感染。

16、IgE:為單體結構,正常人血清中含量最低。IgE為親細胞抗體,介導Ⅰ型超敏反應。特異性過敏反應和寄生蟲早期感染患者血清中可升高。

17、補體:具有酶樣活性的球蛋白(肝細胞、巨噬細胞產生);啟用途徑主要有三種:經典途徑(以結合抗原後的IgG或IgM類抗體為主要啟用劑(雙鏈DNA),C1~C9全部參與)、替代途徑(病原微生物細胞壁成分(脂多糖)直接啟用補體C3,然後完成C5~C9的啟用過程)、MBL途徑(由急性炎症期產生的甘露糖結合凝集素(MBL)與病原體結合後啟動啟用)。

18、補體系統中C3含量最多,C2含量最少。

19、滅活:加熱56℃30分鐘,補體喪失活性

20、補體清除免疫複合物的方式:吞噬調理;免疫粘附;免疫複合物抑制。

21、完全抗原=反應原性+免疫原性。半抗原=反應原性(無免疫原性)

22、抗原抗體結合力(分子間引力):靜電吸引、範德華力、氫鍵、疏水作用力(最強)

23、抗原抗體反應的四大特點:特異性、可逆性、比例性、階段性;受反應條件(如溫度、pH、電解質、抗原抗體比例等)的影響。

24、抗體過量——前帶;抗原過量——後帶(鉤狀效應)

25、抗原抗體反應可分為兩個階段:第一階段為抗原與抗體發生特異性結合的階段,此階段反應快,僅需幾秒至幾分鐘,但不出現可見反應;第二階段為可見反應階段,此階段反應慢,往往需要數分鐘至數小時。

26、顆粒性抗原出現凝集反應。可溶性抗原出現沉澱反應。單價抗原與相應抗體結合不出現沉澱現象。

27、木瓜酶水解IgG為2Fab+Fc;胃蛋白酶水解IgG為F(ab)2+nFc。

28、最常用於免疫動物的佐劑是弗氏佐劑,弗氏佐劑分為弗氏完全佐劑(弗氏不完全佐劑加卡介苗)和弗氏不完全佐劑兩種。

29、R(兔子)型抗血清是用家兔及其他動物免疫產生的抗體,抗原抗體反應比例合適範圍較寬,適於作診斷試劑。

H(馬)型抗血清是用馬等大動物免疫獲得的抗體,抗原抗體反應比例合適範圍較窄,一般用作免疫治療。

30、抗血清常見儲存條件:2-8℃儲存;冷凍儲存(最常用);真空乾燥儲存(5-10年)。

31、雜交瘤細胞放入液氮(-196℃)前,需要逐步降溫。復甦細胞時,從液氮罐內取出凍存管,立即浸入37℃水浴。

32、凝集反應分為兩個階段:①抗原抗體的特異性結合;②出現可見的顆粒凝聚。

33、直接凝集反應的原理是細菌、螺旋體和紅血球等顆粒性抗原,在適當的電解質(0.85%氯化鈉)參與下可直接與相應抗體結合出現凝集。抗原=凝集原,抗體=凝集素。

34、玻片凝集試驗:主要用於抗原的定性分析,AB0血型的測定。

試管凝集試驗:肥達氏試驗、外斐試驗、輸血交叉配血試驗;

35、紅血球包被抗原,用以檢測抗體的血凝反應,稱為正向間接血凝反應(PHA)。

紅血球包被抗體,用以檢測抗原的血凝反應,稱為反向間接血凝反應(RPHA)。

36、間接血凝抑制試驗:可用於檢測抗體、自身抗體、變態反應性抗體,也可測定抗原。

37、金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)

38、血凝試驗可在微量滴定板或試管中進行,將標本倍比稀釋,一般為1:64,同時設不含標本的稀釋液為對照孔。凡紅血球沉積於孔底,集中呈一圓點的為不凝集。如紅血球凝集,則分佈於孔底周圍。

39、明膠凝集試驗(間接):HIV-1抗體和抗精子抗體檢測

40、抗球蛋白試驗,又稱Coombs試驗,是檢測抗紅血球不完全抗體的一種很有用的方法。包括直接Coombs試驗(檢測紅血球上的不完全抗體)和間接Coombs試驗(遊離在血清中的不完全抗體)

41、沉澱反應分兩個階段:第一階段為抗原抗體發生特異性結合,幾秒到幾十秒即可完成,出現可溶性小的複合物,肉眼不可見。第二階段為形成可見的免疫複合物,約需幾十分鐘到數小時才能完成,如沉澱線、沉澱環。

42、免疫比濁:最適pH為6.5~8.5,磷酸鹽緩衝液。

43、對流免疫電泳:抗體流向負極,抗原流向正極

44、免疫固定電泳也用予尿液中本-周蛋白的檢測及κ、λ分型,腦脊液中寡克隆蛋白的檢測及分型。

45、RIA(放免)核素(125Ⅰ)標記抗原,競爭抑制(標記抗原和非標記抗原競爭限量抗體);IRMA(免疫放射)核素標記抗體,非競爭結合(過量標記抗體,反應速率比RIA快,靈敏度明顯高於RIA。)

RIA可以測定大分子和小分子抗原,但IRMA則只能測定至少有兩個抗原決定簇的抗原。

46、常用的熒光素有:異硫氰酸(FITC)黃綠色,最常用;四乙基羅丹明(RB200)橘紅色;四甲基異硫氰酸羅丹明(TRITC)橙紅色;藻紅蛋白(R-RE)橙色。其他:銪(Eu3+)

47、熒游標記蛋白的常用方法:攪拌法和透析法。

熒光抗體效價鑑定:抗原含量為1g/L時,抗體效價>1:16

48、時間分辨熒光免疫測定(TRFIA)以鑭系元素(如:銪)化合物為熒游標記物。

49、偏振免疫測定的偏振波長是485nm(藍光)。

50、辣根過氧化物酶(HRP):底物(1)鄰苯二胺(OPD),(2)四甲基聯苯胺(TMB) ELISA中應用最廣泛的底物。

鹼性磷酸酶(ALP):底物:對-硝基苯磷酸脂(p-NPP)

β-半乳糖苷酶(β-Gal):底物:4-甲基傘酮基-R-D半乳糖苷(4-MUU)

51、異相法:先分離,後測定;均相法:不分離,直接測。

52、酶聯免疫吸附試驗(ELISA):

必要的試劑:①固相的抗原或抗體;②酶標記的抗原或抗體;③酶反應的底物。

抗原測定:蛋白大分子抗原用得最多的是雙抗體夾心法(HBsAg)。只有單個抗原決定簇的小分子,則使用競爭抑制法。

抗體測定:通常使用間接法(HCV、HIV)、雙抗原夾心法(HBsAb)、競爭法(HBcAb、HBeAb)和捕獲法(IgM)等

*待測孔最後顯示的顏色深淺與標本中的待測抗原或抗體呈正相關的是:雙抗體夾心法、雙位點一步法、間接法測抗體;

53、化學發光底物有:直接化學發光劑:吖啶酯和三聯吡啶釕;酶促反應發光劑:(標記酶HRP)魯米諾及其衍生物、(標記酶為鹼性磷酸酶)AMPPD;

54、免疫印跡實驗中常選用多株抗體。

55、外周血單個核細胞的分離的分層液常用:Ficoll(由上到下為血漿,單個核細胞,粒,紅)和Percoll(由上至下:死細胞,單個核細胞,淋,紅,粒)。

56、純淋巴細胞群的採集有:黏附貼壁法,吸附柱過濾法,磁鐵吸引法,Percoll分離液法。

57、T細胞和B細胞的分離:E花環沉降法,尼龍毛柱分離法

58、淋巴細胞活力測定:臺盼藍染色法,死細胞為藍色。

59、CD4是HIV受體,HIV感染時CD4/CD8比值明顯降低。

60、CD4/CD8升高常見於自身免疫性疾病;而CD4/CD8降低常見於病毒感染、惡性腫瘤和再生障礙性貧血等。