外周血單個核細胞中肺炎衣原體的分離、培養及傳代

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畢業論文

全部作者:金前 孫書明 王衛群 餘竹元
第1作者單位:復旦大學附屬金山醫院呼吸科
論文摘要:目的 分離並培養肺炎衣原體(Chlamydia pneumoniae, Cpn),並進行傳代、擴增。方法 分離血液標本中的外周血單個核細胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell, PBMC),用PEG使Cpn-Ag陽性的PBMC裂解釋放出Cpn,然後與Hep-2細胞1起離心,繼續培養Hep-2細胞。再將Hep-2細胞凍融破碎後,放入到新的'Hep-2細胞中進行離心,以完成Cpn的1次傳代,然後以同樣的方法進行2次傳代。分別用微量免疫熒光法(Micro-immunofluorescence, MIF)及PCR法檢測Hep-2細胞中的Cpn-Ag和Cpn DNA。結果 MIF法檢測Cpn感染後的Hep-2細胞,其胞內Cpn-Ag陽性;MIF法檢測1次傳代及2次傳代的Hep-2細胞,其胞內Cpn-Ag亦均陽性;PCR法檢測Cpn DNA陽性。結論 該簡化方法可以實現PBMC中Cpn的分離,並實現進1步的培養及傳代。
關鍵詞:肺炎衣原體;外周血單個核細胞;培養;傳代 遠端下載 論文(免費PDF論文全文)
發表日期:2007年04月27日
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