FQ-PCR法檢測外周血單個核細胞內HCVRNA含量的相關實驗條件分析

才智咖 人氣:2.91W
畢業論文

全部作者:鍾華平 趙偉 沈玲 薛蓉 吳引偉 殷豔天
第1作者單位:東南大學
論文摘要:目的 對採用實時熒光定量PCR(FQ-PCR)法檢測外周血單個核細胞內(PBMC)HCVRNA含量過程中洗滌細胞的方法及標本儲存的條件進行探索。方法分別於同1天內收集分離6例(A組)和11例(B組)血清HCVRNA陽性慢性丙型肝炎患者PBMC,A組分別採用常規法及改良法即在第2 次離心前加入10g/LRNA酶50μl處理15分鐘洗滌細胞5次,並留取每次洗滌液及細胞;B組採用改良法洗滌細胞3次後並把細胞分成2份,分別作為新鮮組和-20℃凍存組,然後採用離心柱型RNA提取法和FQ-PCR檢測洗滌液和細胞中HCVRNA含量。結果①洗滌完3次時,常規法有1份洗滌液HCV為陽性,改良法均為陰性;與第1次洗滌液相比,改良法再洗滌1次的病毒含量下降幅度明顯高於常規法;②新鮮組與凍存組HCVRNA含量不存在明顯差異,Spearman'S相關係數為0.93,P<0.01結論 洗滌PBMC以採用改良法洗滌3次為宜;-20℃簡易凍存6周的'PBMC標本仍可用於FQ-PCR檢測。
關鍵詞:實時熒光定量PCR; 外周血單個核細胞; 丙型肝炎病毒; 遠端下載 論文(免費PDF論文全文)
發表日期:2007年09月25日
同行評議:

1.原文“affiliated with”應“affiliated to”。見牛津現代高階英漢辭典。2.原文“To explore that a method of ......”可為“To examine a methodof ......”。此實驗方法在國內外已開展多年。3.原文“然而本實驗並未出現這種現象,可能與離心引數不同、細胞內病毒含量低和樣本量小等有關(見討論第1節)”。建議:(1)在科技論文中儘可能不用“可能”2字;(2)本研究的樣本量確實是小,能否增加1定的樣本數量。

FQ-PCR法檢測外周血單個核細胞內HCVRNA含量的相關實驗條件分析
綜合評價:
修改稿:
注:同行評議是由特聘的同行專家給出的評審意見,綜合評價是綜合專家對論文各要素的評議得出的數值,以1至5顆星顯示。