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論文題目：《病理學視角下大鯢腹水病的病因分析》
【中文摘要】為了研究大鯢腹水病的主要病原菌及其組織病理,於2009～2010年間在陝西省漢中市多家大鯢養殖場進行腹水病大鯢樣品採集,採集的患病大鯢經活體解剖,在無菌條件下從腹腔、肝臟、肌肉等處分離出單個菌落,純化後進行生理、生化鑑定和分子生物學鑑定;對致病菌採用紙片法進行藥敏實驗;對主要病灶組織肝臟、心臟和脾臟等採用10%溶液固定,常規石蠟切片製片, HE染色,在光學顯微鏡下觀察不同病原導致的大鯢腹水病的病理變化。取得以下結果:1、大鯢“腹水病”病原菌的分離鑑定:通過對4株致病菌的16S rRNA序列測定,並與GenBank資料庫中的16S rRNA序列進行比對,同時進行系統進化樹分析;結合致病菌的形態特徵、培養特徵及生理生化特性,將4株致病菌確定為斯瓦尼菌(Shewanella putrefaciens)、熒光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)、布魯氏桿菌(Brucellaceae bacterium)和嗜麥芽窄食單胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)。2、大鯢“腹水病”病原菌的.藥敏試驗:(1)斯瓦尼菌對硫酸鏈黴素、硫酸卡那黴素、氟苯尼考、乳酸環丙沙星、鹽酸恩諾沙星、鹽酸諾氟沙星、鹽酸左氧氟沙星等高度敏感;(2)熒光假單胞菌對硫酸卡那黴素、氟苯尼考、鹽酸恩諾沙星、鹽酸左氧氟沙星等高度敏感;(3)布魯氏桿菌對硫酸鏈黴素、硫酸卡那黴素、氟苯尼考、乳酸環丙沙星、鹽酸恩諾沙星、酒石酸吉他黴素、阿奇黴素等高度敏感;(4)嗜麥芽窄食單胞菌對硫酸鏈黴素、硫酸卡那黴素、氟苯尼考、鹽酸恩諾沙星、酒石酸吉他黴素、鹽酸左氧氟沙星等高度敏感。4株菌對磺胺對甲胺嘧啶鈉、紅黴素不敏感。3、大鯢“腹水病”主要病灶組織的病理變化:4種病原菌均可造成大鯢肝臟、心臟等組織發生不同程度的病理變化。其主要表現為心肌細胞和肝細胞腫脹,胞漿渾濁,胞漿中可見微細的蛋白質顆粒。肝組織中見大量炎性細胞浸潤。熒光假單胞菌、布魯氏桿菌、嗜麥芽窄食單胞菌都引起大鯢脾臟病變,致使脾臟淋巴細胞增生,但是斯瓦尼菌沒有引起大鯢脾臟的病理變化。本試驗鑑定了4株導致大鯢“腹水病”的致病菌,同時進行了藥敏試驗和組織病理的觀察,對於大鯢“腹水病”的防治具有重要指導意義。
【關鍵詞】大鯢 腹水病 病原 病理 16SrRNA
【目錄】
摘要
ABSTRACT
第一章 大鯢生物學與病害研究進展
1.1 大鯢的生物學特性及養殖現狀
1.1.1 生物學特性
1.1.2 我國養殖現狀
1.2 大鯢病害研究進展
1.2.1 細菌病(Bacterial disease)
1.2.2 真菌病(fungicidal disease)
1.2.3 寄生蟲病(parasitologist)
1.2.4 其他疾病(非寄生性疾病)
1.3 大鯢人工養殖過程中存在的問題
1.3.1 基礎研究工作薄弱
1.3.2 大鯢規模化人工養殖技術還不完善
1.3.3 大鯢人工繁殖技術水平相對落後
1.4 大鯢病害發生與死亡原因分析
1.4.1 管理水平低
1.4.2 飼養水平低
1.4.3 疾病防治難
1.4.4 研究技術落後生產
1.5 選題的目的和意義
第二章 大鯢“腹水病”病原的分離和鑑定
2.1 材料與方法
2.1.1 試驗動物
2.1.2 主要裝置和試劑
2.1.3 病原菌的分離
2.1.4 人工感染試驗
2.1.5 病原菌培養、理化特徵鑑定
2.1.6 病原菌16SrRNA 基因序列測定
2.1.7 病原菌16SrRNA 基因的系統發育學分析
2.1.8 病原菌的紙片法藥物敏感試驗
2.2 結果
2.2.1 人工感染試驗
2.2.2 病原菌培養、理化特徵鑑定
2.2.3 16SrRNA 基因 PCR 產物的瓊脂糖凝膠電泳及序列測定
2.2.4 藥物敏感實驗結果
2.3 討論
2.3.1 急性毒性試驗
2.3.2 菌株的生理生化特徵
2.3.3 菌株16S rRNA 基因序列分析
2.3.4 藥敏試驗結果
2.4 結論
第三章 大鯢“腹水病”的組織病理學研究
3.1 材料與方法
3.1.1 試驗材料
3.1.2 方法
3.1.3 試劑和儀器
3.1.4 組織病理學分析
3.2 結果
3.2.1 大鯢腹水病的症狀
3.2.2 大鯢組織病理學的觀察
3.3 討論
參考文獻
致謝